OBJETIVOS

 

  • Detectar la presencia de microorganismos infecciosos (bacterias) en orina.
  • Identificar el microorganismo infeccioso utilizando pruebas bioquímicas y medios selectivos.
  • Determinar  mediante la proliferación de microorganismos la presencia de una infección. 
  •  INTRODUCCIÓN 

Un urocultivo (cultivo de orina) es una prueba que se realiza en el laboratorio de microbiología clínica que tiene como finalidad detectar la presencia de microorganismos infecciosos, fundamentalmente bacterias y hongos, en la orina de las personas, lo que puede provocar una infección del tracto urinario (ITU).

 

La ITU se define como la presencia y proliferación de microorganismos en el tracto urinario. Habitualmente es bacteriana y excepcionalmente, micótica o vírica. Se pone en evidencia mediante el cultivo de la orina en medios de crecimiento apropiados. Si hay bacterias, crecerán formando colonias que pueden ser contadas como (UFC/ml)2. En la mayoría de los casos, el crecimiento de más de 105 UFC/ml en una muestra de orina puede significar infección.

 

Aproximadamente de 20 a 22% de los urocultivos tienen un resultado positivo. La presencia de bacterias en la orina puede corresponder a varios síndromes clínicos que poseen mecanismos patogénicos propios y significado clínico, tratamiento y pronóstico diferentes, dependiendo del tipo de huésped.

 

 

 

Día 1

Siembra de muestra de orina por estría masiva en dos diferentes medios: Sangre y Cled. Se incubo 24h a una temperatura de 37°C.

 

 Día 2

Se observó crecimiento únicamente en medio Sangre asi como  swarming sobre las colonias.

Realizamos tinción de Wright y morfología colonial macroscópica y microscópica.

 

Día 3

Resiembra en medio Cled por estría cruzada.

Realizamos tinción de Wright y morfología colonial microscópica ademas de realizar un conteo de colonias  

Dia 4

Se realizo prueba de catalasa y oxida ademas de realizar pruebas bioquimicas para si posterior lectura 

      Morfología Macroscópica

Proteus

  • Blanco
  • Brillosa
  • Plana

Colonias redondas

  • Gris
  • Puntiforme
  • Opacas
  • Cóncavas
  • Butiroso

 

    

METODOLOGÍA

RESULTADOS

 

Imagen 1. Placa de Agar CLED 

Se observan colonias puntiformes ademas de Swarrming

Conteo de UFC 

Al realizar el conteo de Unidades formadoras de colonias por mililitro de orina encontramos un promedio de mas de 10,000 unidades formadoras de colonia sobre miilitro de muestrar

Imagen 6.Prueba de catalasa.

Se observo la liberacion de O2, determinando asi como positiva la prueba de catalsa 

Imagen 4. Placa de agar sangre. Se observan Colonias puntiformes y swarming

      Morfología Microscópica

Proteus

  • Bacilos Gram (-)

Colonias redondas                

  • Cocos Gram (-)

Imagen 5. Papel filtro, prueba de oxidasa .

 No se observa ningun cambio de coloracion, determinando una prueba de oxidasa negativa 

Prueba de catalasa y oxidasa

  • Catalasa – Positiva
  • Oxidasa - Negativa

 

 

Imagen 2. Cocos Gram negativos.

Urocultivo. Tinción de Gram

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Imagen 3. Cocos Gram negativo. Urocultivo. Tinción de Gram

 

 

Pruebas Bioquimicas

 Imagen 7 . Prueba bioquímica. MIO positivo

Movilidad positiva ya que se observó turbidez

Se agregaron 3 gotas de reactivo de Kovacs y formando asi un halo amarillento lo que indica un resultado positivo para Indol. 

Imagen 9. Prueba bioquímica. Malonato negativo

Es negativo ya que no presento cambio de color, solo crecimiento.

Imagen 11. Prueba bioquímica. Kliggler positivo

Presenta un color negro por la gran producción de ácido sulfhídrico.

Imagen 10. Prueba bioquímica. LIA positivo

Posee un indicador de purpura de bromocresol

Ph Básico Morado 

Imagen 8. Prueba bioquímica. Citrato de Simmons positivo

Contiene vire. El viraje nos indica que consumió el citrato.

 

  • -Se identifico que el crecimiento bacteriano en los  medios de cultivo fue Proteus ya que este microorganismo realizó un swarming en la superficie de la placa. 
  • -No se logro  realizar la identificación de las colonias puntiformes  ya que no se pudo aislar por completo.
  • -Por medio del conteo de UFC podemos determinar una infeccion en vias urinarias causada por la bacteria Proteus.
  •  

 

ANALISIS DE RESULTADOS

Bibliografia 

Castro. Ana María,Manual ModernoAño : 2014 Edición : 2a ED,bacteriologia medica

C Rodríguez, M Radice, B Perazzi, S Castro… - … y microbiologia clinica, 2005 - Elsevier

El criterio en el que nos basamos para evaluar la presencia de bacterias en la orina fue el de Kast-stanford en el cual se considera que las bacterias provenientes del tracto urinario utilizan la orina como medio de cultivo alcanzado una poblacion superior a 100,000'UFc por ml de muestra.. En la muestra ensayada se encontraron mas de 10,000 UFC por ml de muestra, dando entrender una infeccion causada por bacterias en el tracto urinario. Empleando diversas tecnicas identificamos por medio de tincion de Gram, Un Gram Bacilos Negativo, asi mismo se emplearon pruebas bioquimicas y morfologia colonial para poder determinar la especie. Arrogando asi en la prueba de oxidasa y catalas: un resultado positivo en catalasa mientras que un resutlado negativo en oxidasa, asi mismo en la morfologia colonial se encontro swarming un ligera capa blanqucina la cual se esparcia por todo el medio de cultivo,se utilizaron diversas pruebas bioquimicas para determinar el tipo de bacteria presente arrogando un resultado positivo en  Citrato de Simmons ese contiene vire.el cual nos indica cpor medio del cambio de coloracion el  consumió el citrato. En el medio Malato dio negativo ya que solo existio desarollo bacteriano.En el medio MIO dio positivo a movildad ya que fue presente una turbidez abundante posterior mente Se agregaron 3 gotas de reactivo de Kovacs el cual  formo un halo amarillo lo que indica un resultado positivo para Indol. Para finalizar las pruebas se utilizo un medio Kliggler la cual arrogo un resultado  positivo presentando  un color negro por la gran producción de ácido sulfhídrico.Al analisar los resutados de las diversas pruebas realizadas llegamos a la conclusion que el agente causante de esta infeccion es Proteus vulgaris 

CONCLUSION