Cuaderno digital de Histología Animal ENCB IPN

COMUNICADO HISTOLOGICO

-Cambia tu punto de vista-

  • Jerarquización biológica

  • Pasos del análisis microscópico
  • Interpretación 3D de cortes histológicos

La agrupación de organismos de la misma especie se le denomina población que en su defecto se encuentran formando comunidades de diferentes especies, el ecosistema es la clase siguiente en la jerarquización adjuntando los factores bióticos y abióticos que influyen sobre ellas. Nos referimos a la biosfera como el conjunto de todos los ecosistemas presentes en nuestro planeta.

Es de tipo inclusiva dónde las unidades mas pequeñas son las moléculas que se agrupan mediante enlaces covalentes formando macromoléculas complejas denotando un acomodo especial para formar organelos celulares, ulteriormente células funcionalmente similares, y éstas a su vez forman tejidos especializados de cada órgano, por ultimo la asociación de éstos forman sistemas y un organismo completo y funcional.

Jerarquización Biológica

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Interpretación

Concierne al úiltimo paso del análisis, logrando una exitosa observación-descripción podemos apoyarnos en datos teóricos para la identificación correcta del material biológico. Puedes guiarte por datos proporcionados por el mismo corte, ya sea:

  • La técnica de coloración
  • Procedencia del material
  • Tipo de corte

Para terminar exitosamente este paso responde a la pregunta y realiza un escrito sintetizando el resultado:

  • ¿Qué relación guarda la estructura identificada con la función o funciones supuestas?

Invesigación Documental

Búsqueda, organización y selección de información.

Uso de datos bibliográficos así como también consulta de esquemas, imágenes, y/o fotografías que complementen nuestros datos teóricos.

 

 

Análisis Microscópico

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Técnica Histológica

  • Laminillas / Preparaciones Histológicas

Serie de pasos que nos conducen a obtener una laminilla a través de fundamentos y procedimientos dependientes de la naturaleza del componente biológico y las necesidades del estudio.

 

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Observación y Descripción

Algunas recomendaciones para la observación microscópica de material biológico:

  • Partir de lo general a lo particular.
  • Identificar y diferenciar los componentes de una imagen.
  • Diferenciar su aspecto y coloración.

Recomendaciones para realizar una descripción microscópica:

  • Esquematizar justo como lo observa utilizando los colores correctos.
  • Rotular los componentes de la imagen y colocar pie de figura.

Fijadores más usados:

  • Formaldehido
  • Alcohol
  • Ácido pícrico
  • Tetróxido de Osmio
  • Permanganato de Potasio
  • Ácido Acético Glacial

1. Obtención de material

El material biológico se obtiene del animal muerto o bien sedado por medio de cierto proceso segun sea el caso:

  • Biopsia
  • Cirugía
  • Necropsia
  • Animales de experimentación
  • Tejidos vegetales

Técnica Histológica

2. Fijación

La fijación tiene lugar cuando usamos una solución fijadora, detendrá la autolisis de las células así como también la proliferación de microorganismos que alteren morfológicamente a nuestro material.

Se lleva a cabo por una insolubilización e inmovilización de las proteínas, carbohidratos, lípidos, enzimas, ac. orgánicos y sales. Relación pieza-volumen 1:40

*Provee de afinidad natural a los colorantes

*Endurece y preserva el tejido

3. Eliminación del fijador

El fijador debe ser rápido en su penetración y su acción. Para conseguir un mayor porcentaje de eficacia se hacen mezclas fijadoras, combinando las ventajas de las soluciones.

Después de la fijación ha de ser necesario lavar para retirar el fijador mediante un lavado con agua corriente, alcoholes de distintas graduaciones y en casos especiales soluciones yodadas.

4. Deshidratación

 Ahora necesitamos sustituir el agua presente en el corte debido a que la parafina no es soluble en ella, se usa una sustancia que le proporcione firmeza y dureza para ulteriormente poder tomar un corte de menor grosor (5-10 µm). La parafina es eliminada por medio de cambios graduales de alcoholes empezando por los menos concentrados hasta llegar a un alcohol absoluto para evitar la retracción del tejido.

 

 

 

El fijador se seleccionará conforme a los criterios siguientes:

  • Tipo de estructuras celulares a conservar
  • Fragilidad del corte y cantidad de agua
  • Tamaño de la muestra
  • Objetivo del estudio
  • Técnicas de coloración

6. Inclusión en Parafina

Primeramente se utiliza Parafina I, caracterizada por ser blanda y permitir que el corte penertre con facilidad. (Punto de fusion 53°-55° C).

Parafina II tiene mayor dureza con un punto de fusion que oscila entre 54°-56° C.

El corte termina por ser embebido en Parafina III la mas dura (Punto de fusión 56°-60° C), con ayuda de un molde es incluida para ulteriormente ser cortada en el microtomo. 

5. Transparentación

Debido a que la parafina tampoco es soluble en alcohol ha de ser necesario que sea substituido por un solvente adecuado, como por ejemplo:

  • Tolueno
  • Xileno
  • Acetona

*Para evitar la retracción  del corte o bien quemarlo, estos cambios tambien se harán de forma gradual. Relación pieza-reactivo 1:40

7. Obtención de cortes (5-10 µm)

Para este paso ha de ser necesario contar con un microtomo. A continuación se muestran los pasos para la obtención de microcortes:

  • Coloca el bloque de parafina en la platina y aseguralo bien al brazo del aparato.
  • Coloca la cuchilla y ajusta el bloque, fijarlo.
  • Desliza el carro de la platina hasta quedar paralelamente alineado al bloque con la alineación adecuada.
  • Rebaja la parafina hasta poder ver la pieza.
  • Selecciona el grosor en µm del corte a realizar.
  • Separa los cortes y colocalos dentro de un baño de flotación calentado a 50° C donde se ha disuelto una poca gelatina.
  • Introduce los cortes, extiendelos sobre un portaobjetos.

8. Coloración

Los colorantes son sustancias capaces de combinarse quimicamente brindando color a estructuras o sustancias específicas, tienen como objetivo aumentar el contraste del corte, así sean intereses quimicos, un estudio general o bien, para detectar ciertos componentes particulares.

Están compuestos por 3 elementos:

  • Grupos Cromógenos
  • Grupos Cromóforos
  • Grupos Auxócromos

Colorantes Básicos

También llamados catiónicos, es aquel que cuya parte colorida el electropositiva y se une a componentes celulares ácidos, como por ejemplo; el núcleo.

Elemento Cromóforo

Grupos químicos asociados al color dado que absorben y emiten en longitudes de onda dentro del campo visible. Los más comunes son los siguientes:

  • C=C - etileno
  • C=O - carbonilo
  • C=S - tiazol
  • C=N - cianico
  • N=N - azo
  • N=O - nitroso
  • NO2 - nitro

Colorantes Ácidos

También llamados Aniónicos, es aquel cuya parte colorida es electronegativa y se une a componentes celulares básicos, como por ejemplo; el citoplasma.

Elemento Cromógeno

Aquellos grupos cromóforos asociados a derivados del benceno o a grupo quinoide, forman compuestos coloridos con la capacidad de transmitir su color.

 

Colorantes Neutros

Estos se obtienen cambiando y precipitando ciertos colorantes aniónicos y catiónicos. Al variar las condiciones de pH el precipitado puede expresarse como uno u otro, o bien, como ambos.

Elemento Auxócromo

Al combinar un grupo auxócromo con uno cromógeno éste es transformado en un compuesto con propiedad de disociación electrolítica, determinando su carácter básico o ácido. Expresando así la coloración.

Interpretación 3D de cortes histológicos

 

Corte Oblicuo

Este tipo de corte se realiza de la parte superior a la inferior con la particularidad de que la navaja corte tangencialmente.

Corte transversal

Cuand0 se efectua un corte de este tipo se dice que estamos cortando al órgano por la parte media.

Corte Longitudinal

Es aquel que se realiza a lo largo del órgano a estudiar.

Tejido Epielial

 

El tejido glandular es tejido secretor que forma parte de un organo que no es totalmente glandular.

El órgano glandular hace referencia a aquellos órganos cuya función primordial es la de secretar sustancias.

Tejido Epitelial Glandular

Excreción: Proceso catabolico que ayuda al organismo a desechar sustancias de desecho toxicas para el organismo manteniendolo en homeostasis.

 

Secreción: Hace referencia al proceso que una celula especializada o bien el cojunto de ellas realiza sintetizando compuestos utiles para el metabolismo y regulacion de un organismo

La célula glandular se define como una celula epitelial inmerso en el tejido de revestimiento que tiene propiedades secretoras.

Células productoras de glicoproteínas

Forma: Poliédrica

Núcleo: Ovoide, aplanado, basal

Citoplasma: Poco desarrollado el RER, polirribosomas basales, la region media esta ampliamente ocupada por golgi bien desarrollado, se denota una apariencia vacuolada debido a los grandes glóbulos de secreción. Levemente acidofilo

 


Células productoras de esteroides

Forma: Poliédrica

Núcleo: Esférico y central

Citoplasma: Rico en REL, mitocondrias alargadas con crestas tubulares. El producto de secrecion se acumula confiriendole un aspecto finamente vacuolar con pequeñas gotas lipídicas.

Celulas productoras de proteinas y polipeptidos

Forma: Poliédrica

Núcleo: Esférico, grande y central con nucleolo aparente

Citoplasma: La porcion basal es ocupada por RER con abundantes poliribosomas, granular y basofilo. La zona apical por Golgi con vesiculas secretoras y granulos de secreción. Vacuolas acidofilas

Origen y diferenciacion del tejido epitelial glandular