Instituto Politecnico Nacional.

Una  revista de divulgación científica .

LA TEXTURA DEL TEJIDO.

tome una es gratuita .

informacion y datos  científicos.

Figuras de alta  resolución . .

primero y unico numero.

edicion 2017-1.

DIRECTORIO .

 

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL .

 

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS.

 

LICENCIATURA EN BIOLOGIA.

 

DEPARTAMENTO DE MORFOLOGÍA.

 

HISTOLOGIA ANIMAL.

 

 

 

LA TEXTURA DEL TEJIDO.

 

EDITOR 

ALAMILLA PASTRANA LUIS ALFREDO.

 

ASESORIA TECNICA.

POFESORAS LUEGO PONGO SUS NOMBRES 

 

IMPRESIÓN. EN PROCESO.

INDICE.

 

EN ELABORACIÓN..

CONTINUACION DEL INDICE.

 

IMPORTANCIA DE LA HISTOLOGIA.

 

La histologia tiene campo disciplinario en dos areas, la social y la cientifica, en esta revista nos enfocaremos en la mas atractiva, la cientifica, donde es la biologia la ciencia deivada que mas se auxilia de esta disciplina.Pero la biologia se deriva en muchas areas de estudio, donde la morfologia es completamente dependiente del estuio de los tejidos mediante la histologia ya que disciplinas como la anatomia y la embriologia la usan como base de sus estduios.

La histologia posee diferentes formas de ser estudiada una de ellas es segun el objeto de estudio donde se divide en histologia humana, mas utilizada en el aspecto medico y la histologia animal, con fines mas afines a la  investigacion y a la divulgacion.

Por otra parte segun el tratamiento puede ser h. descriptiva, analitica funcional o comparada.

 

Por ultimo segun las condicion del objeto de estudio donde la histologia normal y patologica son las areas de estudio.

La histologia brinda fundamentos cientificos y se deriva en histologia animal y vegetal. Ambas disciplinas que se rigen por alineamientos y procedimientos similares.

El obejto de estudio de la histologia animal son los cuatro tejidos fundamentales los cuales constituyen  los niveles de organizacion de la materia viva (particulas, atomos, moleculas, celulas, tejidos, organos, sistemas,  organismo viviente).

 

La histologia trabaja  relaciona datos e imagenes histologicas con otras disciplinas, por lo que para resolver problemas histologicos se debe peparar los materiales necesarios, obsevar  descibir imagenes desde un punto de vista biologico, apoyandose de material bilbiografico. Todo lo anterio con el fin de analizar, seleccionar, crear y relacionar las figuras tabajadas.

 

El trabajo de la histologia es efectuar un analisis microscopico de materiales diversos, por lo que se han propesto diversos metodo de trabajo, pero todos se basan en cuatro puntos fundementales que son la investigacion documental, tecnica histologica, observacion,  descripcion del mateial de estudio y la intepetacion de los esultados.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 Investigacion documental.

 

Se refiere a la busqueda, organizacion y  utilizacion sistematizada de la infomacion.

 

Para que nuestro trabajo entre en el terreno de la intelectualidad debemos lograr un manejo adecuado de las fuentes de informacion, en la actulidad las fuentes de informacion  su accesibilidad se han ampliado exponencialmente, lamentablemente corecen de un caracter serio o fidedigno, por lo que se debe ser meticulosos y obsevador con la informacion que manejamos para auxiliarnos. Se debe ser selectivo con la fuente  de infomacion que se utilize.

 

 

ANALISIS MICROSCOPICO.

La organizacion de los datos esta muy relacionado con la investigacion bibliografica, como hemos mencionado es una disciplina la cual tiene aliniamientos, uno de ellos es que debe estar fundementada bibliograficamente, por lo que tener una oganizacion debe se crucail para empezar un trabajo histologico. Se debe registrar  y citar datos bibliograficos para poder fundementar nuestra investigacion.

 

 ¿Esto que fin tiene?, al Realizar un estudio histologico se tiene como fin el descibir una estructura por lo que regulamente se eleboran escritos lo cuales, como se ha mencionado, deben estar bien fundamentados y explicativos por lo que todo lo anteior tiene el fin de relizar una redaccion solida, compresible e irefutable.

Serie de procedimientos que nos permite realizar el estudio microscopico de un tejido.

Es un proceso que comprende desde la obtencion de la muestra hasta el montaje de la laminilla.

Su objetivo es analizar las caracteristicas morfologicas microscopicas normales de un tejido u organo.

Los pasos fundamentales de la tecnica histologica son: obtencion de la muestra, fijacion, eliminacion del fijador, deshidratacion, tansparentacion, inclusion, obtencion de cortes, coloacion y montaje.

Existen diversos agentes fijadores: 

Fisicos;frio y calor.

Quimicos;simples como el formaldehido y compuestos como el bouin.

Como hemos señalado es un paso importante por lo que la eleccion de nuestro fijador debe de satisfacer las caracteisticas del tipo de muestra, como su tamañaño, objetivo de estudio,  la tecnica de coloracion. El formol es conocido como el fijador universal.

TECNICA HISTOLOGICA.

Obtencion de la muestra:

Por necropsia; organismo muertos.

Biopsia; organismos vivos.

Animales de experimentacion.

Tejidos vegetales.

Uso de piezas quierurgicas.

Fijacion:

es un paso que debe ser planificado antes de la toma de muestra,  tiene el objetivo de preservar  mediante una detencion del proceso de autolisis y putrefaccion. 

Por otro lado tambien prepara su ulterior tratamiento,  aumenta la afinidad natural por los colorantes.

Para seleccionar un buen fijador debes considerar que debe ser de rapida penetracion y  accion. Su accion fijadora se lleva acabo por una insolubilizacion de los componentes celulares o tisulares tales como; proteinas, lipidos, enzimas, acidos organicos y sales. Estos componentes son coagulados, precipitan o se gelidifican durante la fijacion, de ahi que se puedan conservar.

Marcha de inclusion.

Tiene como objetivo embeber a la pieza de una sustancia que:

Substitua al agua.

Le proporcione firmeza y dureza para que pueda ser seccionada en cortes del orden de las 5 a 10 micras de groso.

El mateial es regularmente en parafina, tambien se usan resinas sinteticas.

Se compone de los pasos siguientes; deshidatacion, tanpaentacion, impegnacion con paafina.

Eliminacion del fijador.

Posterior a la fijacion biene la eliminacion de este, ya que puede interferir en los pasos siguites en la tecnica.El lavado se hace conmunmente con agua, alcoholes de varias concentaciones y en casos especiales con soluciones yodadas.

Las sustancias de inclusion son de dos naturalesas, las solubles en agua como gelatina, carbowax, glicol metacrilato y los solubles en solventes organicos como la parafina, celoidina y resinas epoxicas.

Para realizar una inclusion se debe dehidratar e infiltrar con el solvente de la sustancia de iclusion.

Los pasos para realizar la inclusion en parafina son:

deshidratacion, impregnacion del solvente (diafanacion) , inclusion y fomacion del bloque.

 

Deshidratacion.

 

Es la extraccion del agua del tejido, esto debido a que el solvente no endureze a la muestra si hay presencia de agua. Para ello se sumerge al tejido en una serie de alcoholes, generalmente alcohol etilico, a. isopropilico, diaxano y cloroformo.

Para la inclusion en parafina se sumerge al tejido en baños sucesivos en soluciones de concentraciones crecientes de alcohol etilico.

 

Inclusion .

 

Proceso de infiltracion de una sustancia, regulamente parafina, la cual confiere consistencia  y dureza necesaios para someter al filo de la navaja a nuestro tejido , esto con el fin de obtener secciones delgadas  del mismo .
Las sustancia de inclusion tienen la caracteistica de infiltarse al inteior de las celulas brindandole un soporte. Como resultado se obtiene un bloque homogeneo con los tejidos y  la sustancia de inclusion, el cual puede se sometido psteiiomente a la anvaja.

Si se realizo una mala deshidratacion al momento de sumergir en el  el liquido diafanizador la muesta tendra un aspecto turbio y blanquesino.

 

Diafanizacion.

 

Debido a que las muestras se encuentran embebidas en alcohol, este debe remplazarse este  por sustancias capacaes de mezclarse con alcohol disolverse  con la parafina. Estos se denominan liquidos diafanizadores, como ejemplos tenemos al xillo, tolueno, benceno y el cloroformo.

Debido a que los sustancias diafanizadoras tiene una alto indice de refraccion, se les confiere un grado de tanspaentacion a los tejidos, dicha propiedad es vital para el poceso de coloracion.

Para la inclusion en parafina se realiza un serie de bañados el alcoho absoluto-xiliol, xilol y un cambio del xilol.

 

 

 

 

 

Inclusion y formacion del bloque.

 

Las parafinas son hidrocarburos saturados probenientes de la destilacion del petroleo.

Existen diferentes tipos de parafinas y  se clasifican segun sus puntos de fusion. Estos oscilan entre los  40 Y 60 °C. La parafina hierve a los 300°C y emite vapores inflamables.

 Se clasifican en:

Blandas; utilizadas en inmiunohistoquimica.

Semiduras; la mas uzada en la tecnica histologica.

Duraz; para ambientes con climas altos.

La penetracion de la parafina sucede cuando se encuentra en su estado liquido. La parafina se expende en forma de bloques los cuales se disuelven usando estufas.Las estufas deben mantenese de 2 a 4 °C por ensima del punto de fusion.

La parafina diluida se coloca en tres resipientes el primeo de mas capacidad recibira a nuestra muestra embebida en xilol, la parafina sustituira al xilol y se infiltara al interior de la misma.Los otros dos recipientes  son mas pequeños y de manera consecutiva recibiran al tejido.El ultimo contendra a la muestra,  posteriormente se utilizara parafina pura para formar a nuestos bloques.

 

Para formar el bloque se llena con parafina un molde, se toma el tejido del tercer recipiente y se orienta a una de las superficies, se sumerge en el interior del molde donde la parafina empieza a solidificase. Se aplica una leve presion. Despues los moldes se enfrian de inmediato para que la parafina se solidifique homogeneamente.

Existen procesadores automaticos que realizan todos los procesos decritos desde la deshidratancion hasta la infiltracion. 

Una vez obtenidos los bloque se pocedera a realizar los cortes histologicos.

Los cortes se realizan en un microtomo, la cual es una maquina que realiza cortes del orden de centecimas de milimetro atraves de navajas.

El procedimiento es el siguiente:

 

-Colocar el bloque en la plantina.

-Colocar la cuchilla.

-Deslizar el carro de la cuchilla.

-Orientar la platina para que ambos queden paralelos y con la inclinacion        adecuada.

-Selecionar el numero de micrometros necesarios.

-Separar los cortes en un baño de flotacion previamente calentado.

-Introducir los cortes, extenderlos y montarlos en el portaobjetos.

 

Parce un proceso sencillo pero debe realizarse sin ningun error y se debe ser meticulosos en cada paso, ya que se podrian acasionar  difilcultades al obtener los cortes.

Existen deversas maquinas que realizan los cortes y conforme avanza la tecnologia dichos aparatos se vuelven mas sofisticados y precisos.

 

Coloracion.

 

Consiste en que una estructura celular o tisular adquiera especificamente un color bajo la accion de una sustancia colorante.

se considera que una estructua se ha colorado o teñido cuando al se lavada con el liquido que disuelve el colorante y no se decolora.

La coloracion tiene el fin de poporcionar color a las estructuras que constituyen un tejido u organo con la finalidad de distinguirlas entre si,  facilita su observacion. Esto debido a que la diafanizacion  tansparenta al corte y dificulta la observacion de sus constituyentes.

Las teorias que fundamentan a la coloracion son de dos tipos; la primera se basa en el proceso fisico de absorcion y  la segunda en la naturaleza quimica  y de enlace molecular del colorante.

 

Los colorantes se clasifican segun su origen en:

 

Colorantes naturales; se extaen de animales como el camin de Best o de Mae y de vegetales como la hemateina y  la safranina.

 

Los colorantes atificiales o sinteticos son compuestos organicos formados de la modificacion del anillo bencenico y se clasifican en;

 

a) Acidos; son sales cuya parte basica es incolora.Tienen carga electrica negativa, por lo que son anionicos.Conocidos como colroantes citoplasmicos.Los acidofilos son sustancias a las cuales les atrae este tipo de coloantes. Ej. eosina, orange G, safranina, verde rapido, azul anilina, etc.

 b) Basicos; sales con base coloreada. Con carga electrica positiva, colorantes cationicos. Se les denomina colorantes nuclares. Las sustancias con afinidad se denominan basidofilas y estan constituidas por componentes acidos. Ej. hematoxilina, rojo nuclear, trionina, fucsina basica, azul de metileno, etc.

c)  Neutros: sales cuyas partes acidas y basicas confieren color (matacromasia). Forman parte de las formulas colorantes para frotis de sangre, como los colorantes de Wight, Ma Gunwald, Giemsa, Leischman, etc.

 d) Indiferentes: no son sales, sin disociacion electronica. Insolubles en agua pero si en solv. organicos y en grasas, por lo que se utilizan para demosta la pesencia de estas, debido a su selectividad. Ej. sudan negro, sudan III,  sudan IV, rojo oleoso.

Observacion y descripcion.

Es la interpretacion de lo observado, basandonos  la relacion estructura-funcion.

Montaje.

 

Su ubjetivo es hacer permanente la peparacion y  peservarla sin deterioro. Consiste en colocar un medio de montaje que sirve de adhesivo entre el portaobjetos y el cubre objetos, de esta manera no se altera el color y  se mantiene transparente.

Existen divesos medios de montaje pero segun su natualeza son acuosos y  no acuosos.

Los medios acuosos como geletinas o goma arabiga no necesitan dehidratarse, permiten la peservacion y  poseen un indece de refaccion bueno, lamenteblemente el tiempo de conservacioon no es muy largo por lo que debe sellarse con barniz.

Los medios no acuosos pueden conservar el material indefinidamente y tienen mayor resistencial al uso. Estos medios necesitan un paso mas, que es la deshidratacion y transparentacion antes del monteje, tieneden a decolorarse al pasa del tiempo.

Para realizar una obsevacion debes:

Patir de lo general a lo particular.

Identificar  diferencias.

Comparar volumen y tamaño.

Tomar encuenta cantidad y frecuancia.

Diferenciar los colores.

Distinguir su arreglo

Diferenciar su aspecto.

Para efectuar una descripcion escrita y oral:

Utiliza vocabulario tecnico.

Estructura las frases correctamente.

Letra legible.

Seguir el  patron propuesto para  la observacion.

Interpretacion de una imagen histologica.

 

Para ello debemos realizar obsevaciones y descripciones, apoyarse de datos teoricos, idetificar la relacion estructura funcion, procedencia y elaborar un ecrito que sintetize los resultados de su analisis.

Existe un obtaculo para el estudio, la misma naturaleza del corte ya que representa las estructua en dos dimenciones, considerando que el oganismo es tidimencional se deben realiza cortes en difeentes planos, (tansvesal, longitudinal  oblicuo) para tener un mejor panorama.

La reconstruccion debe ser considerando que si se observa una estructua nosotros debemos reconstuila tridimencionalmente, por ejemplo los circulos en un cote son esferas y  los rectangulos son cilindros .

Para la descirpcion microscopica se debe esquematizar lo observado y debes considera:

Trabajar con limpieza

Realizar trazos sencillo para repesentar la imagen.

Guardar la relacione tamaño y orden de la estructura.

Usar colores y tonos semejantes al de la muestra.

Acompaña al esquema con un pie de figua.

Histologia.

 

Disciplina que estudia la estructua microscopica de los organismos.  Contempla el conocimiento sobre los niveles de organizacion de la materia viva.

Tambien abarca el conocimiento sobre estructura funcion.

Su campo de accion es en el panorama de las ciencias morfologicas;embriologia, citologia, histologia y anatomia.

Bichart, anatomista franses del siglo VXIII.

Primero en utilizar el termino tejido.

Tejido: capa y estructuras de textua obsevables en una disceccion.

Clasifico 20 tipos de tejidos.

La definicion de tejido a causado controbersia al pasar de los años, ya que la definicon no satisface todas las caracteristicas  funciones de este. Actualmente se puede definir como grupo de celulas similares y espécializadas que realizan funciones determinadas. Cabe señalar que el origen embionaio antes se contemplaba en la definicion, pero la cantidad de inteacciones entre las capas causas controversia.

Existen organos con estructuras y funciones muy variadas.

Se clasifica 4 tipos de tejido:

tejido epitelial, conectivo, muscular y nervioso.

Tejido epitelial.